師弟

救命，細胞又崩了！昨天細胞鋪的密度剛剛好；培養(yǎng)基新配的。上午加重組蛋白刺激，下午收 RNA；今天收上清做 ELISA，發(fā)現(xiàn)細胞變圓皺縮，出現(xiàn)脫落。這結(jié)果能信不？

那炎癥因子怎么樣？

師兄

師弟

你別說，雖然細胞狀態(tài)差，炎癥因子卻高得漂亮。陰性對照好好的，一加重組蛋白就崩了

以我多年踩坑經(jīng)驗，最該懷疑是內(nèi)毒素污染。

師兄

內(nèi)毒素不僅導致細胞狀態(tài)變差，甚至出現(xiàn)「蛋白有活性」的假象！

為什么內(nèi)毒素會傷害細胞？

內(nèi)毒素（Endotoxin）是革蘭陰性菌外膜中獨特的結(jié)構成分，主要成分是脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），是維持細菌正常結(jié)構的主要成分。當細菌發(fā)生裂解、自溶或死亡后，內(nèi)毒素會被大量釋放，粘附在設備表面或污染試劑。

內(nèi)毒素具有較強的熱穩(wěn)定性和吸附性，培養(yǎng)體系中混入的內(nèi)毒素，不僅會造成細胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，如體積縮小、折光率降低等，還可抑制細胞的增殖。內(nèi)毒素的磷酸基團能與細胞膜上的蛋白質(zhì)反應，改變細胞膜形態(tài)，導致細胞功能障礙。對于細胞實驗來說，內(nèi)毒素的影響并不只是讓細胞狀態(tài)變差，更大的問題還在于干擾實驗結(jié)果。

內(nèi)毒素會造成哪些實驗干擾？

1）制造「假陽性」炎癥反應：在免疫學實驗中，內(nèi)毒素是典型的強效免疫刺激劑，可通過 TLR4 等模式識別受體激活下游炎癥信號通路，誘導細胞因子表達升高。對于細胞因子檢測、炎癥信號通路分析、免疫細胞活化、抗原蛋白功能驗證等實驗來說，內(nèi)毒素污染會直接影響實驗結(jié)論。

2）增加樣品異質(zhì)性：在蛋白結(jié)晶和結(jié)構生物學研究中，樣品均一性是決定實驗成敗的關鍵因素之一。內(nèi)毒素結(jié)構復雜、異質(zhì)性高，容易與蛋白樣品或?qū)嶒烍w系發(fā)生非特異性相互作用，增加樣品復雜度和批次差異。對于結(jié)晶篩選、結(jié)構解析、蛋白互作研究等實驗而言，這種額外異質(zhì)性可能影響蛋白穩(wěn)定性和均一性，增加結(jié)晶失敗風險。

3）干擾體內(nèi)藥效與毒性評價：主要體現(xiàn)在動物實驗中，對于體內(nèi)給藥、藥效驗證、毒性評價、免疫治療研究和臨床前藥物開發(fā)而言，內(nèi)毒素污染可能放大炎癥反應，讓研究者誤判藥物或蛋白本身的活性；還可能引入額外毒性風險，導致安全性評價結(jié)果失真。

4）影響細胞治療質(zhì)控：細胞治療產(chǎn)品通常會經(jīng)歷體外擴增、激活、誘導分化或功能改造等流程。在這些過程中，如果所使用的重組蛋白、細胞因子或培養(yǎng)體系中存在內(nèi)毒素污染，可能影響細胞增殖、活化狀態(tài)、分化方向和最終功能。

如何避免內(nèi)毒素污染呢？

針對這一問題，義翹神州給出了全新的解決方案，推出超低內(nèi)毒素重組蛋白。其位于德克薩斯州的生物工程中心（C4B）采用先進的技術工藝和設備生產(chǎn) ProPure? 超低內(nèi)毒素蛋白，將其內(nèi)毒素水平水平控制在 0.05 EU/mg 以下，部分產(chǎn)品甚至達到 0.01 EU/mg，比行業(yè)標準的低了 10 倍以上，為細胞培養(yǎng)提供更可靠的選擇。

如何實現(xiàn)超低內(nèi)毒素？

義翹神州在蛋白生產(chǎn)過程中通過以下工藝升級，確保蛋白的超低內(nèi)毒素水平：

源頭預防：傳統(tǒng)方法使用普通質(zhì)粒和容器，內(nèi)毒素從實驗第一步就開始引入。義翹從質(zhì)粒構建到緩沖液配制，采用嚴格的質(zhì)量控制體系，使用無內(nèi)毒素質(zhì)粒和緩沖液、低內(nèi)毒素吸附塑料容器，并遵循常規(guī)在位清洗（CIP）原則。

環(huán)境隔離：核心環(huán)節(jié)，義翹從「底盤細胞」層面切斷污染源，美國生物工程中心（C4B）在設計之初就確立了「零大腸桿菌」的原則，不使用大腸桿菌表達系統(tǒng)，且不引入任何大腸桿菌或內(nèi)毒素，從物理空間上徹底切斷污染路徑。

雙重檢測：我們采用 LAL（鱟試劑法）和 rFc（重組 C 因子法）方法檢測內(nèi)毒素濃度，嚴格監(jiān)控內(nèi)毒素水平，確保每一批次數(shù)據(jù)可追溯、可信賴。

基于這套嚴密的「預防-隔離-檢測」三重控制體系，義翹神州能夠?qū)?nèi)毒素風險降至檢測限值，為高敏感細胞實驗、免疫功能研究、藥物開發(fā)和臨床前研究提供定制化的超低內(nèi)毒素蛋白產(chǎn)品和服務，滿足嚴苛的質(zhì)量要求。

如何獲得超低內(nèi)毒素重組蛋白？

義翹神州 ProPure? 超低內(nèi)毒素重組蛋白限時促銷火熱開啟！內(nèi)毒素低至 < 0.05 EU/mg，價格打 7 折，實驗室囤貨的時機來了。

義翹神州 ProPure? 超低內(nèi)毒素蛋白，內(nèi)毒素水平降至行業(yè)標準（USP <85>：0.5 EU/mg）的十分之一。在美國 C4B 工程中心穩(wěn)定生產(chǎn)，已面向國內(nèi)開放訂購。新品上市期間，全線 7 折，不玩滿減套路，直接降價。

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義翹神州為全球生命科學基礎研究與創(chuàng)新藥物研發(fā)提供高質(zhì)量產(chǎn)品與專業(yè)化服務，以重組蛋白、抗體、細胞培養(yǎng)基、酶及 CRO 服務為核心，構建覆蓋多領域、多應用的產(chǎn)品服務矩陣。義翹神州建立了嚴謹?shù)娜鞒藤|(zhì)量管理體系，已通過 ISO 9001、ISO 13485、GMP、CNAS 及 CMA 等多項權威認證，確保從研發(fā)到交付的每一個環(huán)節(jié)質(zhì)量可控、結(jié)果可溯，致力于成為全球科研機構與生物醫(yī)藥企業(yè)長期可信賴的合作伙伴。

北京義翹神州科技股份有限公司總部位于北京，于 2021 年 8 月在深交所創(chuàng)業(yè)板上市（股票代碼：301047）。公司已在加拿大、美國、德國、日韓等國家和地區(qū)設立分/子公司，產(chǎn)品與服務覆蓋全球 90 多個國家，累計引用文獻超 20,000 篇。未來，義翹神州將堅持以高質(zhì)量的產(chǎn)品和專業(yè)的技術服務，為生命科學探索與藥物創(chuàng)新提供堅實支撐。

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