編輯丨王多魚(yú)

排版丨水成文

2024 年 1 月，復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院舒易來(lái)教授團(tuán)隊(duì)等在國(guó)際頂尖醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》（The Lancet）上發(fā)表論文【1】，報(bào)道了國(guó)際首個(gè)耳聾基因治療臨床數(shù)據(jù)，這項(xiàng)在 6 名 OTOF 雙等位基因突變的 DFNB9 型先天性耳聾患兒中進(jìn)行的臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，AAV1-hOTOF 基因療法具有良好的安全性和有效性。該研究展現(xiàn)了基因療法在先天性耳聾治療中的巨大潛力，開(kāi)啟了耳聾基因治療新時(shí)代，為進(jìn)一步耳聾基因治療臨床試驗(yàn)注入了一劑強(qiáng)心針，也說(shuō)明了中國(guó)學(xué)者在這一前沿領(lǐng)域的領(lǐng)先地位。

2026 年 4 月 10 日，舒易來(lái)教授在 Cell 子刊Med上發(fā)表了題為：Science breaks silence 的文章，介紹這項(xiàng)基因治療的背后故事【2】。

舒易來(lái)教授講述了對(duì)一名患有 DFNB9 型先天性耳聾的三歲兒童進(jìn)行內(nèi)耳 OTOF 基因治療的經(jīng)歷。在經(jīng)過(guò)詳細(xì)咨詢(xún)和謹(jǐn)慎的雙 AAV 載體手術(shù)給藥后，成功檢測(cè)到了患兒的聽(tīng)覺(jué)腦干反應(yīng)，隨后的早期語(yǔ)言能力也有所發(fā)展。這篇背后故事強(qiáng)調(diào)了多學(xué)科協(xié)作、對(duì)早期結(jié)果的謹(jǐn)慎解讀，以及長(zhǎng)期結(jié)果數(shù)據(jù)的重要性。

我們第一次見(jiàn)到樂(lè)樂(lè)（化名）時(shí)，她才三歲。她的父母不停地叫她名字，但她沒(méi)有回應(yīng)。樂(lè)樂(lè)坐在診室的角落里，望著窗外。當(dāng)她媽媽在她耳邊搖晃撥浪鼓時(shí)，她同樣沒(méi)有反應(yīng)，也沒(méi)有表現(xiàn)出好奇。在聽(tīng)力測(cè)試中，監(jiān)測(cè)儀上沒(méi)有顯示出波形，這是我們見(jiàn)過(guò)太多次的常染色體隱性遺傳性耳聾 9 型（DFNB9）患兒的典型表現(xiàn)。顯然，她生活在一個(gè)無(wú)聲的世界里，也因此還不會(huì)說(shuō)話。許多先天性耳聾的孩子在確診之前，都是這樣開(kāi)始他們的生命的。

無(wú)聲的希望

全球有超過(guò) 2600 萬(wàn)人受到先天性聽(tīng)力損失的影響。其中約 60% 的病例由遺傳因素導(dǎo)致，目前已發(fā)現(xiàn) 200 多種耳聾相關(guān)基因。然而，多年來(lái)，針對(duì)聽(tīng)力損失的基因療法一直未能取得成功。DFNB9是一種非綜合征型常染色體隱性遺傳性耳聾，由 OTOF 基因突變引起。致病的 OTOF 突變會(huì)導(dǎo)致其編碼的 Otoferlin 蛋白的異常，這是一種對(duì)內(nèi)耳毛細(xì)胞向大腦傳遞聲音至關(guān)重要的蛋白質(zhì)，致使這些孩子無(wú)法聽(tīng)到聲音，也就無(wú)法正常發(fā)育語(yǔ)言。雖然人工耳蝸植入術(shù)對(duì)這種孩子有所幫助，但它依賴(lài)于外部設(shè)備，而且一些孩子會(huì)因此感到羞恥；許多孩子在嘈雜環(huán)境中理解言語(yǔ)或欣賞音樂(lè)方面也存在困難。我們覺(jué)得，應(yīng)該有一種更根本的解決方案來(lái)恢復(fù)他們的聽(tīng)力。

“如果病因是基因缺陷，為何不將受損基因替換為功能正常的轉(zhuǎn)基因呢？”我們?cè)谝淮螘?huì)議上問(wèn)道。但大家都明白這有多難。OTOF 基因的編碼序列約 6 kb，這超過(guò)了單個(gè)腺相關(guān)病毒（AAV）載體的包裝容量極限（4.7 kb）。此外，人的耳蝸深藏于顳骨內(nèi)，要精準(zhǔn)地將藥物送達(dá)內(nèi)耳，在技術(shù)上也頗具挑戰(zhàn)性。

雖然困難重重，但我們?nèi)杂浀靡晃换純旱哪赣H說(shuō)道——只要有一線希望，我們就愿意等待。她的話一直縈繞在我們心頭，并影響了我們后續(xù)工作的開(kāi)展方式。

每一步都困難重重

為了解決腺相關(guān)病毒（AAV）的包裝限制問(wèn)題，我們?cè)隗w外和體內(nèi)嘗試了多種策略，包括 DNA 和蛋白質(zhì)層面的方法以及基于基因編輯的解決方案。最終，我們采用雙 AAV 重組的方法（即使用兩個(gè) AAV 分別包裝 OTOF 的一部分，進(jìn)入細(xì)胞后再得以重組）包裝了 OTOF 轉(zhuǎn)基因片段。隨后，我們觀察到了該方法恢復(fù)了 Otof-/- 小鼠的聽(tīng)力以及 Otoferlin 蛋白的表達(dá)。我們反復(fù)檢查了結(jié)果。這感覺(jué)像是朝著我們的目標(biāo)邁出的關(guān)鍵一步。

為加快臨床轉(zhuǎn)化，我們組建了一支由臨床醫(yī)生、聽(tīng)力學(xué)家、生物學(xué)家、遺傳學(xué)家和統(tǒng)計(jì)學(xué)家組成的專(zhuān)門(mén)團(tuán)隊(duì)。我們進(jìn)一步在動(dòng)物模型中評(píng)估了 OTOF 基因療法的安全性和有效性。然而，人的耳蝸深藏于顳骨內(nèi)，圓窗膜直徑僅約 2 毫米。每個(gè)細(xì)節(jié)都至關(guān)重要：如何精準(zhǔn)且輕柔地遞送載體，如何將手術(shù)創(chuàng)傷降至最低，以及何種遞送裝置和微針適合內(nèi)耳注射。此前的臨床實(shí)踐中也沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)耳藥物遞送手術(shù)方法。為應(yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn)，我們反復(fù)討論并測(cè)試各種方案。即便在疫情最嚴(yán)重的時(shí)候，我們也持續(xù)改進(jìn)方法，最終開(kāi)發(fā)出了自己的遞送裝置和方法。我們經(jīng)常在顳骨標(biāo)本上模擬內(nèi)耳遞送，有時(shí)條件十分艱苦。有些決策需要數(shù)月才能敲定。我們常對(duì)學(xué)生說(shuō)，科學(xué)研究意味著學(xué)會(huì)解決前人未曾解決的問(wèn)題。

患兒第一次聽(tīng)見(jiàn)

我們?cè)u(píng)估了該基因療法在小鼠和大型動(dòng)物模型中的安全性和有效性，并開(kāi)發(fā)了一種用于內(nèi)耳給藥的裝置。2022 年，我們啟動(dòng)了（據(jù)我們所知是）全球首個(gè)先天性耳聾基因治療的臨床試驗(yàn)。注射后，我們等待著——緊張、滿(mǎn)懷希望，同時(shí)又不敢妄下結(jié)論。

三周后，樂(lè)樂(lè)的父母告訴我們，她開(kāi)始會(huì)朝著聲音的方向轉(zhuǎn)頭了。在隨訪時(shí)，我們?cè)俅芜M(jìn)行了聽(tīng)力測(cè)試。我們緊盯著屏幕，尋找波形的回歸。清晰的 V 波出現(xiàn)了。面對(duì)這一結(jié)果，我們中的一些人濕了眼睛。隨著時(shí)間的推移，樂(lè)樂(lè)的 V 波潛伏期持續(xù)縮短，振幅穩(wěn)步上升。幾個(gè)月后，她能叫出“爸爸”和“媽媽”。她的母親哭著說(shuō)——我還記得有一次鞭炮聲突然響起，她被嚇了一跳，哭了起來(lái)。她終于能和我們一起聽(tīng)到聲音了。你們改變了我們?nèi)业拿\(yùn)。那一刻，我們感到許多家庭所承受的重負(fù)開(kāi)始減輕，哪怕只是一點(diǎn)點(diǎn)。

類(lèi)似的時(shí)刻接踵而至：三歲的康康開(kāi)始聽(tīng)故事、唱兒歌；健健是首位接受雙耳基因治療的孩子，她已經(jīng)失聰 11 年了。人們普遍認(rèn)為，六歲以后聽(tīng)覺(jué)可塑性會(huì)顯著下降。然而，健健的顯著進(jìn)步讓我們感到驚訝。在接受內(nèi)耳基因治療后，她開(kāi)始能聽(tīng)見(jiàn)聲音，能說(shuō)短句，甚至還能辨別聲源。

舒易來(lái)教授在傾聽(tīng)一個(gè)患兒的耳語(yǔ)

讓更多孩子聆聽(tīng)世界

2023 年 10 月，在比利時(shí)舉行的第 30 屆歐洲基因與細(xì)胞治療學(xué)會(huì)年會(huì)上，我們首次分享了這些發(fā)現(xiàn)，引起了世界各地同行的濃厚興趣，并在正式會(huì)議之外引發(fā)了熱烈討論。隨后，這項(xiàng)工作在美國(guó)舉行的第 47 屆耳鼻喉科研究協(xié)會(huì)會(huì)議上的一次研討會(huì)上再次進(jìn)行了展示，并再次獲得了積極回應(yīng)。在我們展示這些工作后，亞歷山大·格雷厄姆·貝爾聾與重聽(tīng)者協(xié)會(huì)首席戰(zhàn)略官Gayla Guignard博士分享了一首受我們工作啟發(fā)而創(chuàng)作的詩(shī)，這讓我們深受感動(dòng)。后來(lái)，一位來(lái)自哈佛醫(yī)學(xué)院的博士生提到，我們的研究激勵(lì)了一些年輕學(xué)生投身聽(tīng)力研究。

作為醫(yī)師科學(xué)家，這些孩子提醒我們一個(gè)重要的事實(shí)：醫(yī)學(xué)研究絕不僅僅是關(guān)于數(shù)據(jù)。聽(tīng)覺(jué)腦干反應(yīng)（ABR）波形不僅僅是一條屏幕上的曲線——它可能代表著一個(gè)孩子與世界建立聯(lián)系的機(jī)會(huì)。當(dāng)然，我們還有很長(zhǎng)的路要走。

為了支持安全且一致地實(shí)施治療聽(tīng)力損失的基因療法，我們召集了來(lái)自世界各地的專(zhuān)家，共同制定了國(guó)際共識(shí)，并在Med期刊上發(fā)表了我們的研究成果【3】。

OTOF 基因療法只是個(gè)開(kāi)端，我們還在繼續(xù)推進(jìn)針對(duì)其他類(lèi)型耳聾的基因療法。展望未來(lái)，我們的目標(biāo)是幫助更多兒童獲得可用的聽(tīng)力，并更好地了解這如何轉(zhuǎn)化為日常交流和學(xué)習(xí)。

論文鏈接：

1. https://www.thelancet.com/journals/lancet/article/PIIS0140-6736(23)02874-X/fulltext

2. https://www.cell.com/med/fulltext/S2666-6340(26)00068-1

3. https://www.cell.com/med/fulltext/S2666-6340(25)00313-7