做 Western Blot(WB)實驗最頭疼的就是轉印翻車:條帶隱身、背景臟、結果忽好忽壞、重復到崩潰......更何況 WB 實驗涉及樣本準備、蛋白提取、電泳、轉膜、封閉等眾多環節,全程 1~2 天的實驗,一步出錯全白費。
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與其在細節里內耗、靠運氣賭條帶,不如從源頭找到真正影響穩定性的因素。為了幫助大家在復雜的 WB 實驗中獲得更穩定、可靠的結果,Cytiva(思拓凡)推出新品——Cytiva Elite PVDF 轉印膜,同時,我們特別發起有獎調研,參與調研,即有機會贏取電動牙刷、折疊鍵盤、三合一充電線等好禮,1,000 份包郵送 >>
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想告別 WB 玄學,其實關鍵就在一張好膜。Cytiva Elite PVDF 轉印膜,用「膜」法幫你少做重復實驗,穩穩出結果。
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<碧水悠悠,云影輕軟,天光澄澈>
燕語呢喃,草木初萌,處處皆是溫柔生機
天地間一派清和,心亦隨春光舒展
高靈敏度
低豐度蛋白也能「抓得住」
遇到微量、珍貴樣本,蛋白信號弱到看不見?多半是轉印效率低、膜抓不住蛋白。Cytiva Elite PVDF 轉印膜(簡稱「Elite PVDF 膜」)在蛋白結合能力與檢測靈敏度上做出了顯著突破。在相同實驗條件下,Elite PVDF 膜能夠曝光出低至 7.8 ng 的蛋白條帶,展現更高檢測靈敏度。對于相同濃度的上樣量,信號更強更清晰,低豐度靶標不再「隱身」。
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圖 1 轉鐵蛋白 Transferrin 在 Hybond 和 Elite 轉印膜的梯度稀釋 Western Blot 實驗
*使用倍半稀釋的轉鐵蛋白樣品進行 Western Blot 實驗,實驗使用相同的封閉劑、抗體和發光液,保證實驗條件完全一致
超低背景
弱條帶「自帶高光」
高背景像噪音,直接淹沒弱條帶,判讀難、數據不可靠。這時,就要提一個衡量檢測質量的「黃金」標準——信噪比。信噪比越高,條帶則越清晰。Elite PVDF 膜的優勢也正在于此:具有更低的背景信號,從而利于提高信噪比。畫面干凈通透,弱條帶清晰突出,結果好讀又可信。
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圖 2 Hybond 和 Elite 轉印膜在不同通道的背景信號
*對兩種轉印膜分別在 UV、Cy2、Cy5 同時進行 2 S 曝光,獲得的圖片分析其平均信號值
高度實驗穩健性
條件波動依然「穩如磐石」
在 WB 實驗中,同樣的 protocol,換個不同品牌、型號的轉印儀,改個緩沖液配比,甚至換個人操作,結果竟也會「天差地別」,這種不穩定和低可重復性,使得 WB 實驗常被科研學子們調侃為「實驗玄學」。
Elite PVDF 膜在上市前通過了多場景嚴苛驗證來確保兼容性和實驗穩健性。濕轉/半干轉、不同儀器、不同試劑都兼容,條帶清晰、重復性高,實驗更省心。
高物理強度與耐剝離性
實現「一膜多檢」
WB 實驗中,「剝離-再孵育」這一過程更是充滿著挑戰和不確定性:剝離不徹底會導致殘留信號干擾后續結果;剝離過于劇烈則可能損傷膜面結構,導致膜破損或蛋白脫落,使二次孵育失敗。
在樣本極度珍貴、總量極少的情況下,一張具有高物理強度和耐剝離的轉印膜就尤為重要了。Elite PVDF 膜突破性地在物理強度上實現強化,足夠適應「剝離-再孵育」流程的嚴苛考驗。剝離后轉印膜面無可見抗體殘留信號,能夠為后續再孵育實驗提供干凈、可靠的背景。第二次孵育后依然獲得清晰銳利、梯度良好的條帶信號。
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圖 3 Hybond 和 Elite 轉印膜的剝離—再孵育實驗
*使用含有轉鐵蛋白與 GAPDH 的混合樣本進行測試。首次孵育使用轉鐵蛋白一抗,經二抗孵育并曝光成像后,將膜置于剝離緩沖液中處理,并再次曝光以評估抗體殘留情況。隨后對同一張膜重新孵育 GAPDH 一抗,再次進行二抗孵育和曝光,觀察剝離后和二次孵育抗體后的信號強度。
此外,Elite PVDF 膜還兼容化學發光與熒光 Western Blot 蛋白免疫印跡實驗、斑點/狹縫印跡實驗等多種技術場景,應用范圍廣泛。
多位科研 er 參與
首批實測數據 & 反饋新鮮出爐
此前,Cytiva 開展的「膜」法體驗活動——新品試用活動已取得階段性成果。首批測評數據與使用反饋新鮮出爐。
我們邀請了 13 位科研用戶從背景干凈度、條帶清晰度、操作順手度三個維度進行評分,Elite PVDF 轉印膜獲測評用戶全員高分評價!
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以上用戶試用反饋表,每個維度最優 5 分,最差 1 分
部分用戶實測條帶圖展示:
膜表現如何?條帶返圖會說話!
Cytiva 此次以「膜」法升級,為 WB 實驗帶來更高效的解決方案,致力于讓重復實驗止于一張好膜。未來 Cytiva 將以持續創新的產品,支持每一份專注,見證每一次突破,以專業,加速每一次蛋白研究!
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新品指南
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心動不如行動,快點識別下方二維碼參與活動贏好禮,同時還能申請新品試用
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關于 Cytiva(思拓凡)
Cytiva(思拓凡)是全球生命科學領域的知名解決方案提供商,專注于科研蛋白質研究方向。我們有一系列的產品和解決方案,其中 ?KTA?、Biacore 和 Hyclone 都是科研界的明星產品,已成為很多實驗室的「標配」。
Cytiva 最早源自法瑪西亞,后歸入 GE 生命科學。現在是丹納赫集團旗下獨立運營公司,和 Leica、Beckman、Abcam 是「兄弟品牌」。
我們的核心價值,在于打通「科研到產業化」的關鍵鏈路。學術端,我們覆蓋了 985、211 等國內頂尖科研院校和全球頭部專家,累計超 10 萬用戶群體。比如昌平實驗室、清華北大等頂尖院校,還有院士專家團隊,都在使用我們的方案。產業端,在細胞治療、基因治療、抗體等研發領域,超過 90% 以上的專家/企業都選擇了 Cytiva 的技術解決方案。頭部藥企都是我們的長期客戶。從實驗室的微小突破到惠及全球患者的新藥上市,Cytiva 始終以「專業」加速每一次蛋白探索。
內容策劃:鄒禮平
內容審核:周育紅
題圖來源:圖蟲創意
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