PCR 是分子生物學最基礎、最常用,卻也最容易「翻車」的實驗技術。條帶拖尾、彌散、雜帶叢生、擴增效率低、孔間差異大、實驗難以重復…… 這些問題長期困擾科研人員,而絕大多數(shù)失敗并非來自試劑或操作,往往是 PCR 程序設置不合理。
1991 年,國際權威期刊 Nucleic Acids Research 就發(fā)表經典研究證實:PCR 循環(huán)數(shù)超過 30 個周期后,特異性產物產量不再上升,反而持續(xù)下降;繼續(xù)增加循環(huán)會出現(xiàn)明顯拖尾與非特異性擴增;循環(huán)數(shù)達到 44 時,目標條帶幾乎完全消失。
1990 年,Nucleic Acids Research 另一篇論文研究證實:PCR 退火溫度直接決定擴增特異性,溫度過低易引發(fā)非特異性雜帶,溫度過高會導致擴增失敗,合理優(yōu)化退火溫度是獲得清晰可靠條帶的關鍵。
PCR 想要穩(wěn)定、高效、可重復,可以考慮遵循標準化參數(shù)邏輯。以下為實驗室通用 PCR 核心公式,可直接套用。
表 1 PCR 核心參數(shù)干貨表
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表 2 常見問題快速修正表
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綜上,合理的程序設置是 PCR 成功的前提,而精準、穩(wěn)定、均勻的溫控系統(tǒng),則是讓參數(shù)真正落地、實驗結果高度一致的硬件保障。
伯樂新一代 PCR 熱循環(huán)儀:讓實驗參數(shù)真正落地
掌握了 PCR 優(yōu)化的核心邏輯后,一臺性能可靠的熱循環(huán)儀,能讓實驗成功率直接翻倍。深耕 PCR 領域 40 余年的 Bio-Rad 伯樂,憑借深厚技術積累推出全新 PTC Tempo 與 PTC Harmony 系列熱循環(huán)儀,以精準溫控、智能操作、穩(wěn)定性能,為現(xiàn)代分子生物學實驗室提供一站式解決方案。
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Bio-Rad 新款 PTC Tempo 和 PTC Harmony 熱循環(huán)儀面向現(xiàn)代分子生物學實驗室,適用于科研院校和生物醫(yī)藥研發(fā)質檢場景,在保持熱性能的同時增加了智能化操作功能。
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PTC Tempo 和 Harmony
熱循環(huán)儀的核心優(yōu)勢
精準溫控
?六模塊獨立控溫:采用帕爾貼效應技術,六個獨立熱電模塊控制溫度均勻性,在升降溫階段保持穩(wěn)定
?快速升降溫:專利輕量化樣品模塊,加熱冷卻速度快于標準模塊,縮短實驗時間
?減少邊緣效應:模塊設計減少邊緣效應,保證各孔位實驗的一致性
智能優(yōu)化
? 8 英寸觸摸屏,圖形界面直觀易用
?溫度梯度功能:30~100 °C 范圍內可設置 24 °C 梯度,單次實驗優(yōu)化退火溫度,節(jié)省樣本和試劑
?動態(tài)升降溫:算法調整升降溫速度,使所有孔位同時達到設定溫度,保證孵育時間一致
現(xiàn)代化操作
?PTC Tempo 系列:
Wi-Fi 無線連接
BR.io 云平臺,支持遠程監(jiān)控和設置實驗
自動化蓋可集成自動化工作流程(PTC Tempo 96/Deepwell/384 型號)
可選安全版軟件,符合 FDA 21 CFR Part 11 要求
?PTC Harmony 系列:
保留核心熱性能
以太網和 USB 連接
手動蓋性價比高
?數(shù)據(jù)安全
云端數(shù)據(jù)自動備份
數(shù)據(jù)傳輸和存儲加密
強密碼策略
定期安全測試
產品型號
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選擇 Bio-Rad 的理由
40 年 PCR 技術積累
ISO 13485 質量認證
完整的技術支持網絡
提供 PCR 儀器、試劑、成像分析完整產品線
Bio-Rad PCR 領域的可靠伙伴
配套產品
PCR 試劑:iScript cDNA 合成試劑盒、SsoAdvanced 預混液系列
電泳系統(tǒng):Mini-Sub? Cell GT 水平電泳儀系列
成像系統(tǒng):GelDoc? Go 和 ChemiDoc? Go 凝膠成像系統(tǒng)
分子量標準:EZ Load 系列 DNA 分子量標準
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立即聯(lián)系預約產品演示或試用
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* Bio-Rad, GelDoc, ChemiDoc和Mini-Sub為Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定區(qū)域的商標。本文所使用的所有商標均歸其各自所有者所有。? 2026 Bio-Rad Laboratories, Inc.
* 本產品僅用于科研用途,不用于臨床診斷。
內容策劃:沈佳鈺
內容審核:周育紅
題圖來源:圖蟲創(chuàng)意
參考文獻
[1]. Bell D A, DeMarini D M. Excessive cycling converts PCR products to random-length higher molecular weight fragments[J]. Nucleic Acids Research, 1991, 19(18): 5079.
[2]. Rychlik W, Spencer W J, Rhoads R E. Optimization of the annealing temperature for DNA amplification in vitro[J]. Nucleic Acids Research, 1990, 18(21): 6409-6412.
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