長期壓力（比如被排擠、孤立）會(huì)讓人情緒低落，甚至發(fā)展成抑郁癥。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，科學(xué)家常用“慢性社會(huì)挫敗應(yīng)激”（CSDS）小鼠模型來模擬這種狀態(tài)，這些小鼠會(huì)變得不愿社交、對(duì)甜食失去興趣、行動(dòng)遲緩，表現(xiàn)出典型的“抑郁樣行為”。

基于此，廣州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院張榮、安琳、深圳市寶安區(qū)中醫(yī)院梁奇研究團(tuán)隊(duì)在《International Immunopharmacology》雜志發(fā)表了“Facilitating microglia M2 polarization alleviates p-Synephrine-induced depressive-like behaviours in CSDS mice via the 5-HT6R-FYN-ERK1/ 2 pathway”揭示了促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞M2極化通過5-HT6R-FYN-ERK1/2通路緩解對(duì)p-Synephrine誘導(dǎo)的慢性社會(huì)挫敗應(yīng)激（CSDS）小鼠抑郁樣行為。

本研究發(fā)現(xiàn)，天然化合物 p-SYN 能有效緩解慢性社會(huì)挫敗應(yīng)激（CSDS）小鼠的抑郁樣行為和社交障礙并減輕神經(jīng)炎癥。其機(jī)制在于：p-SYN可穿透血腦屏障直接結(jié)合 5-羥色胺6受體（5-HT6R），阻斷其與酪氨酸激酶 FYN 的相互作用，從而抑制 5-HT6R-FYN-ERK1/2 信號(hào)通路。這促使小膠質(zhì)細(xì)胞由促炎的 M1型（CD86?/iNOS?）向抗炎的 M2型（Arg-1?/CD206?）極化，降低TNF-α、IL-6，升高IL-10，最終發(fā)揮抗抑郁作用。

圖一 p-SYN能有效緩解CSDS小鼠的抑郁樣癥狀

p-SYN給藥治療持續(xù)三周，隨后對(duì)小鼠的社交互動(dòng)（）和抑郁行為進(jìn)行評(píng)估。氟西汀在相同時(shí)間段內(nèi)以同樣方式給藥作為對(duì)照。

社交互動(dòng)實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)階段：第一階段無攻擊性小鼠存在，第二階段有攻擊性小鼠存在。在第一階段，對(duì)照組與CSDS組之間、氟西汀組與p-SYN組之間，在社交區(qū)域和非接觸區(qū)域的社交互動(dòng)時(shí)間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。在第二階段，接受氟西汀以及接受30mg/kg和60mg/kgp-SYN治療的小鼠在接觸區(qū)域停留的時(shí)間顯著增加，表明其社交功能障礙得到緩解。

在三箱社交互動(dòng)實(shí)驗(yàn)中，p-SYN改善了CSDS小鼠在環(huán)境探索和社會(huì)新奇刺激下的社交回避行為，提高了社交指數(shù)；氟西汀治療也獨(dú)立地產(chǎn)生了類似的改善效果。值得注意的是，氟西汀組和60mg/kgp-SYN組與新引入小鼠的接觸時(shí)間顯著增加，提示其社交回避行為得到恢復(fù)，社交能力指標(biāo)有所提升。

圖二 p-SYN能有效緩解CSDS小鼠的抑郁樣癥狀

在發(fā)現(xiàn)p-SYN能夠緩解社交行為障礙后，作者進(jìn)一步驗(yàn)證其是否可改善抑郁樣行為。

結(jié)果顯示，在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，與CSDS組相比，氟西汀和60mg/kgp-SYN治療顯著增加了小鼠的總移動(dòng)距離和軌跡密度。同樣，在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)（）中，不動(dòng)時(shí)間明顯減少，同時(shí)蔗糖偏好率升高，表明該治療有效緩解了抑郁樣癥狀。

有趣的是，在新奇環(huán)境攝食實(shí)驗(yàn)中，p-SYN給藥并未顯著縮短小鼠首次接觸食物的時(shí)間，但卻顯著延長了其在中央?yún)^(qū)域的停留時(shí)間。

圖三 p-SYN促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型極化，從而介導(dǎo)其抗炎作用

為探究p-SYN對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞極化的影響，研究在動(dòng)物和細(xì)胞模型中進(jìn)行了驗(yàn)證。

組織學(xué)結(jié)果顯示，與CSDS組相比，氟西汀和p-SYN治療減輕了內(nèi)側(cè)前額葉皮層（mPFC）的炎癥浸潤和神經(jīng)元損傷，體現(xiàn)出抗炎保護(hù)作用。

有趣的是，高劑量p-SYN在mPFC中同時(shí)升高了促炎因子（TNF-α、IL-6）和抗炎因子IL-10的水平，但免疫熒光和Western blot分析一致表明：p-SYN顯著促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2抗炎型極化，在HMC-3細(xì)胞和腦組織中均觀察到M2標(biāo)志物（CD206、Arg-1）上調(diào)，M1標(biāo)志物（CD86、iNOS）下調(diào)（其中CD86在腦組織中變化不顯著）。

綜上，p-SYN主要通過推動(dòng)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)化，發(fā)揮神經(jīng)抗炎作用。

圖四 p-SYN與5-HT6R結(jié)合

為驗(yàn)證p-SYN是否直接作用于5-HT6R，研究采用了CETSA和DARTS兩種靶點(diǎn)結(jié)合實(shí)驗(yàn)。

CETSA結(jié)果顯示，在p-SYN處理后的HMC-3細(xì)胞和小鼠內(nèi)側(cè)前額葉皮層（mPFC）中，5-HT6R蛋白的熱穩(wěn)定性顯著增強(qiáng)即使加熱至66°C仍保持完整，而對(duì)照組（DMSO處理）的該蛋白則明顯降解，表明p-SYN結(jié)合后提高了其熱穩(wěn)定性。DARTS實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，經(jīng)蛋白酶消化后，p-SYN處理組中5-HT6R的殘留量顯著高于未加藥對(duì)照組，說明p-SYN與5-HT6R形成了穩(wěn)定的直接結(jié)合。

兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)共同證明：p-SYN能特異性、穩(wěn)定地結(jié)合5-HT6R，為其調(diào)控下游信號(hào)通路和發(fā)揮抗抑郁作用提供了關(guān)鍵分子基礎(chǔ)。

總結(jié)

p-SYN顯著改善了CSDS模型小鼠的社交障礙和抑郁樣行為，并有效減輕了腦區(qū)及小膠質(zhì)細(xì)胞中的炎癥反應(yīng)，展現(xiàn)出良好的抗炎和抗抑郁作用。p-SYN通過結(jié)合5-HT6R，抑制促炎因子的表達(dá)并促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型極化。p-SYN通過抑制5-HT6R–FYN–ERK1/2信號(hào)通路發(fā)揮其抗抑郁效應(yīng)。

文章來源：

https://doi.org/10.1016/j.intimp.2024.113926

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