新物體識別測試基于這樣一個(gè)事實(shí):與熟悉的物體相比,嚙齒動物會花更多時(shí)間探索新物體。在這項(xiàng)任務(wù)中,受試者在初次熟悉階段會接觸到一個(gè)物體。在接下來的測試階段,動物會接觸到同一個(gè)熟悉的物體和一個(gè)新物體。受試者應(yīng)該能夠記住開始的物體,并花更多時(shí)間探索新物體。這項(xiàng)任務(wù)既需要物體識別能力,也需要記憶認(rèn)知能力,而這些能力在突變株、神經(jīng)退行病模型或接受某些藥治 療后可能會受到影響。
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設(shè)備和器材
新物體識別和開放場地測試使用的是類似的設(shè)備。該設(shè)備由一個(gè)被高墻環(huán)繞的正方形區(qū)域組成。大鼠是72cm(長)*72cm(寬)*40cm(高),小鼠是40cm(長)*40cm(寬)*40cm(高)。墻體通常是啞光黑色、白色或透明的,以防止反光。
選擇物體對于測試的一致性和可靠性至關(guān)重要。由于嚙齒動物很難分辨許多顏色,因此需要考慮所選物體的亮度、形狀和質(zhì)地。物體的重量也需要足夠,以防受試動物移動它,或者需要將物體粘附在測試區(qū)域的底部。物體的形狀應(yīng)防止受試動物攀爬或坐在上面,因?yàn)橐曨l跟蹤軟件很難對這種類型的移動進(jìn)行評分。如果物體是不對稱的,則每次試驗(yàn)時(shí)都應(yīng)將其放置在相同的位置。重要的是,物體應(yīng)是無味的,并且不會在試驗(yàn)之間保留任何嗅覺線索。
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測試區(qū)域應(yīng)有足夠的照明但光線柔和,以便動物能夠看到并探索周圍環(huán)境,同時(shí)避免強(qiáng)光帶來的壓力。
使用固定安裝的攝像機(jī)從箱體上方記錄實(shí)驗(yàn)過程。可以使用跟蹤軟件來追蹤迷宮內(nèi)動物的活動,例如Noldus EthoVision或VisuTrack等軟件。同時(shí),也可以進(jìn)行實(shí)時(shí)評分。
訓(xùn)練方案
新物體識別測試的目的是測量動物的探索能力、記憶力和物體識別能力。通過觀察動物對熟悉物體的記憶能力,該測試可用于比較假手術(shù)對照組動物與病癥模型組動物之間的差異。在測試過程中,受試動物會接觸到兩個(gè)物體,其中一個(gè)物體是受試動物之前接觸過的,因而是熟悉的。控制組動物應(yīng)該能夠記住熟悉的物體,并花更多時(shí)間探索新物體,而認(rèn)知能力受損的動物可能會同等地探索兩個(gè)物體。
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使用新物體識別測試評估探索活動和記憶
新物體識別測試可以在不同程度地適應(yīng)測試區(qū)域后進(jìn)行。長時(shí)適應(yīng)方案涉及在連續(xù)三天內(nèi),每天兩次將受試動物暴露于空的測試區(qū)域五分鐘。短時(shí)適應(yīng)方案則讓受試動物在熟悉階段前一天對測試區(qū)域進(jìn)行一次五分鐘的暴露。另外,適應(yīng)并非必 要步驟,受試動物可以直接進(jìn)入?yún)f(xié)議的熟悉部分。
如果進(jìn)行了適應(yīng)過程,則在適應(yīng)結(jié)束后的一天,受試動物會與一個(gè)物體進(jìn)行熟悉。在測試區(qū)域放置兩個(gè)相同的物體,彼此之間以及與區(qū)域墻壁之間保持幾厘米的距離。打開攝像機(jī),將受試動物放入測試區(qū)域,面對與物體相反的方向,并允許其自由探索。使用秒表測量受試動物探索物體的時(shí)間。當(dāng)受試動物總共探索物體二十秒,或經(jīng)過十分鐘后,將其從區(qū)域中移出并放回其飼養(yǎng)籠中。
受試動物與一個(gè)物體熟悉后,即可進(jìn)行測試階段。在此階段,受試動物會接觸到兩個(gè)不同的物體,其中一個(gè)與熟悉階段使用的物體相同,另一個(gè)是新物體。這些物體放置在與熟悉階段相同的位置。打開攝像機(jī),將受試動物放入測試區(qū)域,面對與物體相反的方向,并允許其自由探索。受試動物應(yīng)該花更多時(shí)間探索新物體,而不是熟悉的物體。當(dāng)受試動物探索新物體二十秒,或經(jīng)過十分鐘后,將其移出。
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示例數(shù)據(jù)
從新物體識別測試中獲得的數(shù)據(jù)主要包括動物探索物體所花費(fèi)的時(shí)間。這些數(shù)據(jù)可以直接繪制成圖表,以便比較熟悉階段探索一個(gè)物體所花費(fèi)的時(shí)間與測試階段探索新物體所花費(fèi)的時(shí)間,如下所示。
另一種數(shù)據(jù)可視化方法是計(jì)算差異分?jǐn)?shù)和辨別分?jǐn)?shù):
探索新物體時(shí)間 - 探索熟悉物體時(shí)間 = 差異分?jǐn)?shù)
探索新物體時(shí)間 / 探索兩個(gè)物體總時(shí)間 = 辨別比率
差異分?jǐn)?shù)為正且辨別比率大于0.5是衡量物體識別的指標(biāo),可以跨動物組進(jìn)行比較,如下表所示。在這個(gè)例子中,一種突變型大鼠無法區(qū)分新物體和熟悉物體,幾乎花費(fèi)相同的時(shí)間來探索這兩個(gè)物體。這導(dǎo)致差異分?jǐn)?shù)較低,辨別比率接近0.5。這些結(jié)果可能表明該突變體可能存在記憶或保留缺陷。
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