浙江
做過小鼠實驗的人都知道，最磨人的往往不是實驗設計，而是那些防不勝防的「意外」：
場景一：母鼠吃仔
好不容易等到條件性敲除母鼠產下一窩幼崽，第二天卻只剩兩只——只因手上殘留的消毒劑氣味，讓母鼠「不認親崽」，直接吃掉了自己的后代。
場景二：Cre 品系選錯
拿到 flox 小鼠后，興沖沖地配了全身性 Cre 工具鼠，結果發現目的基因在全身被敲除，小鼠胚胎期就死亡了。原來應該選組織特異性 Cre 或誘導型 CreERT2，而不是全身性 Cre。
場景三：PCR 對照缺失的「烏龍」
跑 PCR 鑒定基因敲除小鼠基因型，只跑了樣品孔，沒設空白對照和陽性對照。結果某些樣本出現一條微弱條帶，分不清是真實擴增還是氣溶膠污染。
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干貨一：母鼠吃仔的「防吃清單」
生產前后三天不換籠：新生仔氣味敏感，換籠會破壞熟悉環境，增加母鼠焦慮。
手上別帶「異味」：接觸母鼠或仔鼠前，用籠內墊料搓一下手套，覆蓋外來氣味。
補充「月子營養」：每只母鼠每天可喂 1～2 顆瓜子或少量堅果，提高泌乳質量，減少吃仔。
必要時請「代乳」：提前準備母性好的同期哺乳母鼠，將需代乳仔鼠涂抹代乳鼠籠內的墊料或尿液，再放入。
干貨二：Cre 工具鼠選型
全身性 Cre：在全身所有組織細胞中表達，若靶基因對發育必需，可能導致胚胎期或圍產期死亡。
組織特異性 Cre：僅在特定組織（如肝、腦、T 細胞）表達，適合研究基因在特定器官的功能。
誘導型 Cre（如 CreERT2）：需注射他莫昔芬才入核發揮作用，可實現時空特異性敲除，避免胚胎致死。
干貨三：PCR 鑒定必設的三種對照
空白對照（以水代替 DNA 模板）：檢測試劑、耗材及環境是否存在核酸污染。若空白出現條帶，說明有氣溶膠污染。
陰性對照（已知野生型小鼠 DNA）：確認野生型條帶大小是否符合預期，并監測擴增特異性。
陽性對照（已知雜合子或純合子 DNA）：確認 PCR 體系工作正常，避免假陰性。
小提示：三類對照缺一不可，否則出現異常條帶時無法快速定位問題，白白浪費時間。
干貨四：小鼠常用編號方式「三選一」
斷趾法（適用 5～7 日齡幼仔）：剪趾位置在遠側指骨與中側指骨關節處，用鋒利器械減少應激。優點：編號永久清晰；缺點：不適合敗血癥、關節炎模型或抓力測試等實驗。
耳緣打孔法（適用成年小鼠）：左耳代表十位數，右耳代表個位數，用耳標器或手術剪做出缺口。注意：耳朵可能愈合或打架撕裂，需定期檢查。
耳標法（適用成年小鼠）：將帶數字的耳標打入耳朵，操作最快。注意：耳標易被同籠小鼠咬掉或自行抓掉，需及時補打。
關于藥康生物
江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司（科創板代碼：688046）是一家專注于實驗動物小鼠模型研發、生產及非臨床研究服務的國家級高新技術企業，同時是科技部認定的國家遺傳工程小鼠資源庫共建單位。依托 CRISPR/Cas9、ES 打靶等在內的基因編輯技術，公司建立了國際一流的基因修飾動物模型研發平臺，擁有近 3 萬種自主知識產權的基因工程小鼠模型品系，其中包括基因敲除/條件性敲除小鼠品系（"斑點鼠計劃"）、藥靶基因人源化模型、復雜疾病模型、系列免疫缺陷小鼠品系、無菌小鼠品系以及用于抗體藥物發現的 NeoMab? 全人源抗體轉基因小鼠，為全球科研機構、CRO 公司及醫藥企業提供全面的模型資源支持。
內容策劃：沈佳鈺
內容審核：周育紅
題圖來源：圖蟲創意
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